Nuus

Javascript is tans in jou blaaier gedeaktiveer.Sommige kenmerke van hierdie webwerf sal nie werk as JavaScript gedeaktiveer is nie.
Registreer met jou spesifieke besonderhede en die spesifieke dwelm van belang, en ons sal die inligting wat jy verskaf met artikels in ons uitgebreide databasis pas en dadelik 'n PDF-kopie aan jou e-pos.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Departement van Aansteeklike Siektes, Suzhou Universiteit Eerste Geaffilieerde Hospitaal, Suzhou City, Jiangsu Provinsie, 215000 Tel.gewasse van die spysverteringstelsel met 'n 5-jaar algehele oorlewing van 14,1%.Baie pasiënte met HCC word in 'n gevorderde stadium gediagnoseer, so vroeë sifting is noodsaaklik om mortaliteit van HCC te verminder.Benewens algemeen gebruikte opsporingsaanwysers soos serum alfa-fetoproteïen (AFP), lens-lektien-reaktiewe alfa-fetoproteïen (AFP-L3) en abnormale protrombien (vitamien K-tekort-geïnduseerde proteïen II, PIVKA-II), vloeistofbiopsie tegnieke Daar is getoon dat dit van diagnostiese waarde is in die opsporing van HCC.In vergelyking met indringende prosedures, kan vloeistofbiopsie sirkulerende kwaadaardige metaboliete opspoor.Vloeistofbiopsietegnieke bespeur sirkulerende tumorselle, sirkulerende tumor-DNA, sirkulerende RNA en eksosome en word gebruik vir vroeë sifting, diagnose en prognostiese evaluering van HCC.Hierdie artikel hersien die molekulêre biologie en toepassing van verskeie vloeistofbiopsie-tegnieke om belowende biomerkers te isoleer wat lewensvatbare opsies vir vroeë assessering van HCC kan wees om vroeë sifting van hoë-risiko HCC-groepe te verbeter.Sleutelwoorde: vloeistofbiopsietegniek, hepatosellulêre karsinoom, hoërisikogroep.
Hepatosellulêre karsinoom (HCC) is 'n algemene kwaadaardige gewas van die spysverteringskanaal, die sesde plek onder nuwe gevalle van kwaadaardige gewasse in beide mans en vroue.1 Wêreldwyd is lewerkanker die derde grootste oorsaak van kankersterftes na long- en kolorektale kanker, wat verantwoordelik is vir 8,3% van kankerverwante sterftes as gevolg van alle kwaadaardige neoplasmas.1 Die prognose van HCC is nou verwant aan die stadium van diagnose.Die hoofredes vir swak oorlewing in HCC is intrahepatiese metastases, portale veneuse tumor trombi, en ver metastases wat reseksie uitsluit, en baie van hierdie kenmerke is reeds teenwoordig by pasiënte ten tyde van diagnose.
Gebaseer op diagnostiese en behandelingsriglyne, is die belangrikste risikofaktore vir die ontwikkeling van HCC sirrose van die lewer, chroniese hepatitis B-virus (HBV) of hepatitis C-virus (HCV) infeksie, alkoholiese vetterige lewersiekte en nie-alkoholiese vetterige lewersiekte (NAFLD) ).2 Daarbenewens sluit risikofaktore vir HCC aflatoksien-besmette voedselinname, skistosomiase, ander oorsake van sirrose, 'n familiegeskiedenis van lewerkanker, diabetes, vetsug, rook en dwelm-geïnduseerde lewerbesering in.35- en 45-jarige hoërisikogroepe moet gereelde mediese ondersoeke ondergaan.Vroeë sifting is 'n belangrike vroeë behandelingstrategie om die algehele oorlewing van pasiënte met HCC te verbeter.
Biomerkers soos AFP, AFP-L3 en PIVKA-II word aanbeveel vir vroeë sifting van HCC3,4.Vloeibare biopsie tegnieke het belowende resultate getoon in vroeë diagnose en behandeling evaluering.5,6 Beduidende vordering is gemaak in HCC-vloeibare biopsie, wat hoër sensitiwiteit en spesifisiteit kan hê as algemeen gebruikte serummerkers soos AFP (Tabel 1).
AFP is 'n wyd gebruikte biomerker in HCC en is tans die mees gedetailleerde biomerker wat wyd gebruik word vir vroeë sifting, diagnose en evaluering van die siekte.'n Aanhoudende verhoogde AFP-vlak word as 'n risikofaktor vir die vordering van HCC beskou.7,8 Die opsporingstempo van klein hepatosellulêre karsinoom (sHCC) neem toe met die ontwikkeling van ultraklank en rekenaartomografie, en daar is gevind dat AFP besonder onsensitief is vir die opsporing van hHCC in kliniese praktyk.Volgens 'n retrospektiewe multisentrumstudie9 is AFP-positief in 46% (616/1338) van HCC-gevalle en 23.4% (150/641) van sHCC-gevalle gevind.Daarbenewens is AFP-vlakke verhoog by pasiënte met chroniese lewersiekte en sirrose.10 AFP het dus 'n beperkte siftingseffek vir sHCC.11 Volgens die Asië-Stille Oseaan Kliniese Praktykriglyne vir Hepatosellulêre Karsinoom word die gebruik van AFP nie aanbeveel nie.12 Kliniese bewyse dui daarop dat PIVKA-II beter is as AFP in die behandeling van HCC en dat die kombinasie van PIVKA-II en AFP 'n hoër diagnostiese waarde in HCC.13 In vergelyking met weefselbiopsie, spoor vloeistofbiopsie hoofsaaklik tumor-geassosieerde metaboliete in liggaamsvloeistowwe (bloed, speeksel, pleurale vloeistof, serebrospinale vloeistof of urine) op en is minder indringend vir weefsels.14 Daarbenewens kan vloeibare biopsies kwaadaardige kenmerke weerspieël wat nie in primêre tumorweefsel teenwoordig is nie.15 Vloeistofbiopsies word nog nie in die kliniese praktyk vir alle tipe gewasse getoets nie, maar hul diagnostiese potensiaal in kanker trek die aandag van onkoloë.16 Vloeistofbiopsie kan sirkulerende tumorselle (CTC's), sirkulerende tumor-DNA (cDNA), sirkulerende vrye RNA (ecRNA) en eksosome opspoor.In hierdie artikel sal ons die kenmerke, rol en toepassing van verskeie vloeistofbiopsietegnieke in vroeë sifting van hoërisiko-HCC-groepe bespreek.
Ekstrasellulêre DNA (cfDNA) in bloedmonsters van gesonde individue is die eerste keer in 1948 beskryf deur Mandel et al.17 cfDNA is 'n selvrye DNS-fragment van ongeveer 160–180 bp lank, wat hoofsaaklik afkomstig is van limfosiete en myeloïede selle.ctDNA is 'n spesifieke mutante DNA-fragment wat deur tumorselle in die perifere bloed vrygestel word, wat die genomiese inligting van tumorselle verteenwoordig na sekere patofisiologiese prosesse, insluitend nekrose, apoptose en uitskeiding.Die proporsie van ctDNA in totale cfDNA verskil wyd met tumortipe, en cDNA-fragmente word gerapporteer om tipies minder as 167 bp lank te wees.18 Underhill se studie het getoon dat cfDNA-fragmente oor die algemeen korter as normale cfDNA is.19 In vergelyking met gesonde individue is die totale lengte van cfDNA-fragmente in die bloed van kankerpasiënte korter, dus kan cfDNA as 'n aanduiding van vroeë tumorsifting gebruik word.Verryking van sekere subsets van cfDNA-fragmentlengtes kan die opsporing van cDNA wat met nie-metastatiese soliede gewasse geassosieer word, verbeter.Studies het getoon dat ctDNA in meer as 75% van gevorderde pankreas-, kolon-, blaas-, gastro-intestinale, lewer-, eierstok-, bors-, melanoom- en kop- en nekkanker gevind word.20,21 Die hoeveelheid ctDNA in die bloed hang egter af van die ligging van die gewas.22 In 'n studie deur Bettegoud is gevind dat pasiënte met kolorektale-, bors-, lewer-, long- en prostaatkanker hoër vlakke van cDNA in hul bloed het as ander kankers.In teenstelling hiermee, by pasiënte met mondkanker, pankreaskanker, maagkanker en glioom, was cDNA-konsentrasie in die bloed laer.een en twintig
Omdat ctDNA dieselfde genetiese mutasies as primêre tumorselle bevat, kan cDNA gebruik word om heterogene tumorspesifieke mutasies en epigenetiese veranderinge op te spoor, insluitend metilering, hidroksimetilering, enkelnukleotiedvariasies en kopiegetalvariasies.drie en twintig
DNA-metilering is een van die mees algemene epigenetiese veranderinge wat tot geenonderdrukking lei.In vergelyking met normale selle is daar verskille in die algehele vlak van metilering van die tumorselgenoom, veral in die metilering van tumoronderdrukkergene, wat op 'n vroeë stadium opgespoor kan word, wat daarop dui dat veranderinge in DNA-metilering 'n aanduiding van vroeë opsporing van tumorgenese.Tumoronderdrukkergene wat met HCC geassosieer word, kan geïnaktiveer word deur promotormetilering, waardeur tumorgenese gestimuleer word.24 DNA-metilering is 'n ideale merker vir die vroeë diagnose van gewasse as gevolg van sy weefselspesifisiteit, waarneembaarheid en ouderdom-onafhanklikheid.Daarbenewens is DNA-metilering meer algemeen in vergelyking met somatiese mutasies omdat daar meer teikenstreke en verskeie veranderde CpG-plekke in elke streek van die teikengenoom is.25 Benewens veelvuldige CpG-plekke, is 'n groot aantal onafhanklike hipermetileerde lokusse in ctDNA in DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 en RGS10.26 Xu et al.Vergelyking van cfDNA monsters van 1098 HCC pasiënte en 835 gesonde kontroles was gene wat met HCC geassosieer word, sterk korreleer met die ooreenstemmende plasma cDNA metilerings handtekeninge.25 Gebaseer op laboratoriumanalise, is 'n voorspellende model ontwikkel wat 10 metileringsmerkers bevat met sensitiwiteit en spesifisiteit van onderskeidelik 85.7% en 94.3%, en hierdie merkers was hoogs gekorreleer met tumormassa, tumorstadium en reaksie op behandeling.Hierdie resultate dui aan dat die gebruik van cDNA-metileringsmerkers groot belofte inhou in die diagnose, monitering en prognose van HCC.In 'n metileringsmodel bestaande uit drie afwykend gemetileerde gene (APC, COX2, RASSF1A) en een miRNA (miR203) aangebied deur Lu et al27, was die sensitiwiteit en spesifisiteit van model 27 vir die diagnose van HBV-geassosieerde HCC vergelykbaar.80%.Daarbenewens kon die model 75% van ongediagnoseerde HCC-pasiënte met 'n AFP-vlak van 20 ng/ml opspoor.Die geen vir die Ras-geassosieerde domeinfamilie 1A-proteïen (RASSF1A) is die hoofherhalende DNA-volgorde in die menslike genoom.Araujo et al.tot die gevolgtrekking gekom dat hipermetilering van die RASSF1A-promotor 'n waardevolle biomerker vir vroeë sifting van HCC en 'n potensiële molekulêre teiken vir epigenetiese terapie kan wees.28 In een studie is serum RASSF1A promotor hipermetilering gevind in 73.3% van pasiënte met HCC.29 Lang interspersed nukleotied element 1 (LINE-1) is nog 'n hoogs aktiewe retrotransposisie bemiddelaar.Hipometilering van LINE-1 is gevind in die DNA van 66.7% van HCC serummonsters en was geassosieer met vroeë herhaling en swak oorlewing na radikale reseksie.29 Hipermetilering is 'n algemene genetiese proses wat 'n unieke rol speel in die ontwikkeling van lewersirrose en HCC.30 Hierteenoor is hidroksimetielering 'n demetileringsproses wat geen-reaktivering en uitdrukking veroorsaak, en die opsporing van die 5-hidroksimielsitosien (5-hmC) produk in hierdie proses kan gebruik word om 'n gewas te identifiseer.Metilering en hidroksimetilering van cDNA word geassosieer met tumorgenese en kan bydra tot die vroeë sifting van HCC.In 'n studie van 2554 proefpersone is 31 genoomwye 5-hmC's in cfDNA-monsters gevind, en 32 gene is geïdentifiseer deur 5-hmC-volgordes in HCC-pasiënte en hoërisikogroepe soos dié met chroniese siektes te vergelyk.Diagnostiese modelle van lewersiektes.en sirrose.Hierdie model was beter as AFP om HCC van nie-tumorweefsel te onderskei.
Mutasies in koderende streke kan lei tot transkripsionele abnormaliteite, wat kan lei tot veranderinge in proteïenvolgordes en uiteindelik kanker.Enkelnukleotiedvariante is belangrike genomiese merkers vir vroeë tumorsifting as gevolg van hul hoë weefselbetroubaarheid en hoë tumor- en weefselspesifisiteit.Talle HCC-verwante studies wat volgende generasie volgordebepaling (NGS) gebruik vir eksoom- en heelgenoomvolgordebepaling van kanker het algemene gemuteerde sellulêre gene soos TP53 en CTNNB1 geïdentifiseer, asook verskeie insluitend ARID1A, MLL, IRF2.Die nuwe gene, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 en JAK1 toon matige mutasietempo's. Mutante geenfunksie-analise dui daarop dat veranderinge in chromatienhermodellering, Wnt/β-catenin en JAK/STAT seintransduksie, die P53-sel siklusbaan, epigenetiese modifiseerders, oksidatiewe stresweë, die PI3K/AKT/MTOR-roete en die RAS/RAF/ MAPK kinase-weg speel deurslaggewende rolle in HCC onkogenese.32,33 In 'n studie waarin tumor-geassosieerde mutasies opgespoor is, het Huang et al gevind dat die frekwensie van tumor-geassosieerde mutasies afhanklik van ctDNA was 19.5%, en die spesifisiteit was 90% .34 Daarbenewens was pasiënte wat vaskulêre inval ervaar het, meer geneig om ctDNA-mutasies (P=0.041) en korter herhalingsvrye oorlewing (P<0.001) te hê. Mutante geenfunksie-analise dui daarop dat veranderinge in chromatienhermodellering, Wnt/β-catenin en JAK/STAT seintransduksie, die P53-sel siklusbaan, epigenetiese modifiseerders, oksidatiewe stresweë, die PI3K/AKT/MTOR-roete en die RAS/RAF/ MAPK kinase-weg speel deurslaggewende rolle in HCC onkogenese.32,33 In 'n studie waarin tumor-geassosieerde mutasies opgespoor is, het Huang et al gevind dat die frekwensie van tumor-geassosieerde mutasies afhanklik van ctDNA was 19.5%, en die spesifisiteit was 90% .34 Daarbenewens was pasiënte wat vaskulêre inval ervaar het, meer geneig om ctDNA-mutasies (P=0.041) en korter herhalingsvrye oorlewing (P<0.001) te hê.Mutante geenfunksie-analise dui daarop dat veranderinge in chromatienhermodellering, Wnt/β-catenin en JAK/STAT sein, P53 selsiklusroete, epigenetiese modifiseerders, oksidatiewe stresbane, PI3K/AKT/MTOR-roete en RAS/RAF/MAPK kinase-roete speel 'n kritieke rol in HCC tumorgenese.32,33 In 'n studie wat tumor-geassosieerde mutasies gevind het, het Huang et al.gevind dat die frekwensie van ctDNA-afhanklike tumor-geassosieerde mutasies 19,5% was en die spesifisiteit 90%..34 Кроме того, у пациентов с сосудистой инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) en teen 1,041 teen jaar. .34 Daarbenewens het pasiënte met vaskulêre inval meer cDNA-mutasies (P=0.041) en 'n korter siektevrye oorlewing (P<0.001) gehad.Funksionele analise van die mutante gene het chromatienhermodellering, Wnt/β-catenin en JAK/STAT sein, die P53 selsiklusroete, epigenetiese modifiseerders, die oksidatiewe stresbaan, die PI3K/AKT/MTOR-roete en die RAS/RAF/MAPK geopenbaar kinase-weg speel 'n kritieke rol in onkogenese van HCC. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中 ， ， Huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 ctDNA 的 频率 为 19,5% ， 特异性 为 90% .34 此外 ， 经历 血管 侵犯 的 患者 更 有 可能 发生 发生 ctDNA突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0.001）。 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究 ， huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 ctdna 的 为 为 19.5% ， 特异性 为 90% .34 此外 经历 血管 侵犯 的 更 可能 发生 ctdna突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0,001）.32,33 In 'n studie wat tumorverwante mutasies gevind het, het Huang et al.gevind dat tumor-geassosieerde mutasies 19.5% afhanklik was van cDNA met 'n spesifisiteit van 90% 34. Daarbenewens was pasiënte wat vaskulêre inval ondergaan het meer geneig om cDNA te ontwikkel.мутация (P = 0,041) en более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutasie (P=0.041) en korter siektevrye oorlewing (P<0.001).Nog 'n algemene HCC-drywer-geen is TP53, wat 'n mutasiekoers van meer as 30% het.Studies het getoon dat die frekwensie van TP53-mutasies in ctDNA in bloed en urine wissel van 5% tot 60%.35 Johan se studie het getoon dat die ctDNA-mutasiespektrum in laat HCC 'n soortgelyke mutasietempo as vroeë HCC het, insluitend die TERT-promotor (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), mutasies in AXIN1., ARID2, KMT2D en TSC2 (6% elk).36 Die β-catenin (CTNNB1) onkogeen speel 'n belangrike rol in die Wnt seinpad.Die transkripsie-koaktiveerder CTNNB1 kan geenuitdrukking bevorder, wat kan lei tot selproliferasie, inhibisie van apoptose en angiogenese.CTNNB1 kan ook interaksie met TERT hê om hepatosiettransformasie te veroorsaak.33 Die TERT-promotor word gereeld in sommige soliede gewasse gemuteer.Veranderinge in TERT, een van die vroegste genetiese veranderinge in kwaadaardige transformasie van HCC, kan lei tot telomerase-reaktivering in sirrotiese hepatosiete en kan proliferasie bevorder en veroudering voorkom.Daar is gerapporteer dat mutasies in die 33-37 TERT-promotor in 59-90% van pasiënte met proliferatiewe lewernodules en vroeë HCC voorkom en word geassosieer met oorlewing.38
Kopiegetalveranderinge (CNA) is 'n belangrike subtipe van somatiese mutasies.Navorsing het getoon dat die wydverspreide en fokuslas van CNA 'n genomiese handtekening is wat in staat is om tumor-immuuninfiltrasie en -uitsluiting in sommige soorte kanker te voorspel.39 Aktiewe infiltrasie sein, hoë sitolitiese aktiwiteit, ernstige inflammasie en genetiese merkers wat verband hou met antigeen aanbieding in HCC.Ontleding van die data-skikking van enkelnukleotied polimorfismes in 477 proefpersone het 'n lae las op die SSS aan die lig gebring.In teenstelling hiermee het chromosomaal onstabiele gewasse met 'n hoë uitgebreide CNA-lading tekens van immuunverwerping getoon en is geassosieer met proliferasie, DNA-herstel en TP53-disfunksie.Xu et al.het getoon dat die HCC-groep hoër CNA-tellings gehad het as die chroniese lewersiektegroep.40 Deur gebruik te maak van heelgenoomvolgordebepaling van 'n enkele sel, is gevind dat CNA's vroeg in hepatokarsinogenese verskyn en relatief stabiel bly tydens tumorprogressie.41 Chung et al.gevind dat cfDNA vlakke aansienlik verhoog is in HCC pasiënte en dat genoomwye CNAs in cfDNA 'n belangrike onafhanklike prognostiese merker was in HCC pasiënte wat met sorafenib behandel is.42 Pasiënte met 'n hoër CNA-las was meer geneig om siekteprogressie en dood te hê as dié met 'n laer CNA-las.Ollerich et al.gevind dat kopiegetal onstabiliteitsindeks (CNI) gebruik kan word om CNA in cfDNA van kankerpasiënte te bepaal.Hulle het opgemerk dat pasiënte met gevorderde kanker aansienlik hoër CNI-tellings gehad het as 'n kontrolegroep, wat pasiënt se reaksie op sistemiese chemoterapie en immunoterapie beoordeel.43 Hierdie resultate dui daarop dat CNA's gevind in vloeibare biopsie monsters kan dien as prognostiese aanwysers in pasiënte met gevorderde kanker.HCC op die agtergrond van sistemiese terapie.
Tans kan die metodes wat gebruik word om ctDNA op te spoor in geteikende en nie-geteikende metodes verdeel word.Kortliks, geteikende metodes soos digitale polimerase kettingreaksie (dPCR), BEAMing digitale PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq en Tam-Seq is hoogs sensitief vir vooraf gedefinieerde gene.Nie-teikenmetodes soos heelgenoomvolgordebepaling en NGS bied 'n omvattende oorsig van die hele genomiese landskap.44 In vergelyking met teikenpanele, kan heelgenoomvolgordebepaling nie net puntmutasies en invoegings opspoor nie, maar ook herrangskikkings en kopiegetalvariasies.prognose, en CTC en cfDNA is goeie aanwysers wat gebruik kan word vir dinamiese monitering van HCC.45 Daarbenewens kan cfDNA-analise meer nuttig wees om HCC op te spoor.Yan et al.het getoon dat cfDNA in die plasma van pasiënte met HCC aansienlik hoër was as in pasiënte met lewerfibrose en gesonde kontroles.In vergelyking met AFP, word verwag dat ctDNA 'n beter siftingsmerker vir vroeë HCC sal wees.46 In 'n voornemende studie van 47 vloeibare biopsies wat cfDNA en proteïen in 'n bevolkingsbevolking getoets het, is getoon dat dit effektief is om pasiënte met HCC van pasiënte sonder HCC te onderskei.In 'n opvolg van 331 ultraklank normale en AFP-negatiewe pasiënte, was die sensitiwiteit en spesifisiteit van cfDNA vir die diagnose van HCC onderskeidelik 100% en 94%, sodat cDNA HCC kon opspoor in asimptomatiese HBsAg seropositiewe individue.In die Yeo48-studie is 'n hoë frekwensie (92.5%) van hipermetilering van die RASSF1A-promotor by pasiënte met HCC gevind.Daarbenewens het Xu et al.'n diagnostiese model geskep om HCC te voorspel deur 'n paneel van spesifieke metileringsmerkers met 'n spesifisiteit en sensitiwiteit van onderskeidelik 90.5% en 83.3% te gebruik.Die paneel laat pasiënte met HCC toe om te onderskei van pasiënte met ander lewersiektes, wat beter is as AFP.Hulle het ook bevind dat normale kontroles wat positief getoets het, risikofaktore vir HCC kan hê, soos HBV-infeksie of 'n geskiedenis van alkoholgebruik.25 Ons veronderstel dat hoërisikofaktore vir HCC hipermetilering van cfDNA kan bevorder, wat dan bydra tot die vordering van HCC, en dus kan cfDNA 'n sleutelrol speel in sifting vir hoërisikogroepe.Cai et al.som die volle reeks ctDNA-mutasies op en bied 'n robuuste strategie vir die assessering van tumorlas by pasiënte.49 Hierdie strategie kan tumorgenese identifiseer 'n mediaan van 4,6 maande voor beeldverandering en het uitstekende diagnostiese prestasie getoon in vergelyking met serum biomerkers AFP, AFP-L3 en PIVKA-II.Die diagnostiese waarde van cDNA-toetsing is gedemonstreer wanneer beeldevaluering nie beskikbaar is nie, dus is cDNA-toetsing van waarde in die diagnose van vroeë HCC in hoërisikogroepe.Onlangs het wetenskaplikes NGS-tegnologie gebruik om aanwysers van meerveranderlike genetiese variasie (insluitend 5-hidroksimielsitosien, 5'-motief, fragmentasie, nukleosoomspoor, HIFI) in 3204 kliniese monsters en cfDNA te ontleed.50 Hergevalideerde HIFI-modelle met drie onafhanklike trein-, toets- en toetsstelle het stabiele en betroubare diskriminasie getoon tussen HCC en nie-HCC populasies met onderskeidelik 95.79% en 95.42% sensitiwiteit in HCC-spesifieke toets- en toetsstelle.Die geslagte was onderskeidelik 95.00% en 97.83%.Die diagnostiese waarde van die HIFI-metode is hoër as dié van AFP om HCC van sirrose te onderskei.Daarbenewens word ctDNA ook in chirurgiese behandeling gebruik.Atsushi et al.het die preoperatiewe serumvlakke van ctDNA in pasiënte met HCC bepaal en gevind dat die herhalingstempo en die ekstrahepatiese metastasetempo in die cDNA-positiewe groep aansienlik hoër was as in die cDNA-negatiewe groep, en cDNA-vlakke was betekenisvol gekorreleer.met tumor progressie.51 Omdat dit 'n hoogs sensitiewe biomerker is, kan ctDNA die vermoë van HCC voorspel om vate binne te dring.Wang et al.het heelgenoomvolgordebepaling van 46 pasiënte met HCC uitgevoer, en meerveranderlike analise het getoon dat die drempelwaarde van die alleelfrekwensie van die cDNA-variant vir indringing in mikrovate 0.83% is, sensitiwiteit 89.7% en spesifisiteit 80.0%.'n onafhanklike risikofaktor vir mikrovaskulêre inval in resekteerbare HCC, wat daarop dui dat cDNA kan help om optimale behandeling te lei.Ten slotte, ctDNA is ten volle betrokke by die voorkoms en ontwikkeling van HCC en kan gebruik word vir vroeë sifting, chirurgiese evaluering en siektemonitering.
CTC's is kwaadaardige selle wat afkomstig is van primêre gewasse of metastases wat metastaseer na die bloedstroom.Tumorselle skei matriksmetalloproteïnases (MMP's) af, wat die keldermembraan afbreek, sodat tumorselle direk in die bloed- en limfvate kan ingaan.Die meeste CTC's word egter vinnig uitgeskakel deur anoikis, immuunaanval of skuifspanning.53 Die epiteel-mesenchimale oorgang (EMT) laat CTC'e maklik geïsoleer word van die primêre tumorweefsel, kapillêre binnedring en aansienlik verbeterde oorlewing, metastase, indringendheid en geneesmiddelweerstand verkry.Studies het getoon dat daar diepgaande heterogeniteit tussen die verskillende tumorselle in primêre metastatiese gewasse is.So, CTC analise kan lei tot 'n omvattende begrip van tumor sel heterogeniteit.54
Spesifieke merkers vir HCC-geassosieerde CTC's sluit in glipican-3 (GPC3), asialoglikoproteïenreseptor (ASGPR), epiteelseladhesiemolekule (EpCAM) en stamsel-geassosieerde merkers soos CD44, CD90, 55 en intersellulêre adhesiemolekule 1 (ICAM1).) .56 Die GPC3 merker is 'n selmembraan-geankerde proteïen wat klinies gebruik word vir patologiese analise en karakterisering van HCC.57 Uitdrukking van GPC3 is meer algemeen in HCC tumorselle met intermediêre en lae differensiasie en bevorder ekstrahepatiese migrasie;boonop dui die teenwoordigheid van GPC3+ CTCs op metastatiese HCC.58 ASGPR is 'n transmembraanproteïen wat slegs op die oppervlak van hepatosiete uitgedruk word en word hoogs uitgedruk in goed gedifferensieerde HCC.EpCAM is een van die mees gebruikte membraan-geassosieerde proteïene om CTC's vas te vang.EpCAM is geïdentifiseer as 'n oppervlakmerker van HCC-selle met stamselkenmerke,59 wat korreleer met verskeie kliniese patologiese kenmerke van HCC, soos vaskulêre inval, geassesseerde AFP-vlakke en gevorderde stadium van lewerkanker by die Barcelona Hospitaal (BCLC).Die 60 CTC EMT fenotipe is hoogs metastaties.54 EMT-prosesse in die CTC bevorder HCC-metastase.Uitdrukking van EMT merkers soos vimentien, draai, E-boks sinkvinger binding (ZEB) 1, ZEB2, slak, slak en E-cadherin is bestudeer in lewer-afgeleide CTCs van HCC pasiënte.58 Die CanPatrol™-stelsel wat deur Cheng [61] ontwikkel is, het CTC's in drie fenotipiese subgroepe geklassifiseer gebaseer op oorwegend uitgedrukte merkers: epiteelfenotipe (EpCAM, CK8/18/19), mesenchimale fenotipe (vimentien, opgerol), en gemengde fenotipe.In 176 pasiënte was totale CTC beter as AFP om HCC van benigne lewersiekte te onderskei.Die AUC-waardes vir totale CTC, AFP en gekombineerde totale CTC en AFP was 0,774 (95% CI, 0,704–0,834), 0,669 (95% CI, 0,587–0,750) en 0,821 (95% CI, 0,756–0,856–0,856) ).), onderskeidelik.CTC klassifikasie gebaseer op EMT kan HCC diagnose, vroeë herhaling, metastase en korter algehele tyd voorspel.
Tans sluit metodes vir die opsporing van CSC's fisiese metodes en biologiese metodes in.Fisiese metodes, wat dikwels na verwys word as verryking gebaseer op biofisiese eienskappe, hang hoofsaaklik af van die fisiese eienskappe van die KDS, soos grootte, digtheid, lading, mobiliteit en vervormbaarheid.Afhangende van die fisiese eienskappe, is daar verskeie metodes soos filtrasie-gebaseerde stelsels, diëlektroforese, ens. Laasgenoemde, ook bekend as immunoaffiniteit-gebaseerde verryking, is hoofsaaklik gebaseer op antigeen-teenliggaambinding aangesien die metode teenliggaampies teen tumorspesifieke biomerkers gebruik. soos EpCAM, ASGPR, menslike epidermale groeifaktorreseptor 2 (HER2), prostaatspesifieke antigeen (PSA), menslike pancytokeratin (P-CK) en karbamoielfosfaat sintase 1 (CPS1).62 'n Ander tipe, wat die geen-verrykingsmetode genoem word, gebruik vloeisitometrie om CTC's van leukosiete te onderskei op grond van 'n hoër kern-tot-sitoplasmiese verhouding en grootte.Tans is die enigste FDA-goedgekeurde toets vir die opsporing van CTC's die Cell-Search™-stelsel, wat die EpCAM-seloppervlakmerker gebruik. Gekombineerde merkers-gebaseerde CTC-opsporing kan egter die positiwiteitstempo verhoog.54 'n Mengsel van teenliggaampies teen ASGPR en CPS1 het 'n CTC-opsporingskoers van 91% in HCC-pasiënte behaal.63 Zhang et al het 'n CTC-Chip met teenliggaampies teen ASGPR gebruik, P -CK en CPS1, en het HCC-pasiënte gedifferensieer van diegene met benigne lewersiekte of nie-HCC-kanker teen 'n koers van 100%.64 'n Studie deur Wang het EpCAM+ CTC's in 60% van 42 HCC-pasiënte opgespoor en beduidende korrelasies gevind tussen beide die positiwiteit koers en die aantal CTC'e met TNM-stadium.65 Guo et al het gevind dat 'n CTC-afgeleide PCR-telling verhoog is in 125/171 (73%) pasiënte wie se AFP-vlak <20 ng/mL was met 'n sensitiwiteit van 72.5% en 'n spesifisiteit van 95.0%, in vergelyking met 57.0% en 90.0% vir AFP by 'n afsnypunt 20 ng/ml.66 Die kombinasie van AFP en CTC's kan HCC-opsporing verbeter.45 Daar word geglo dat CTC's 'n voordeel bo AFP het in vroeë sifting van groepe met 'n hoë risiko vir HCC. Gekombineerde merkers-gebaseerde CTC-opsporing kan egter die positiwiteitstempo verhoog.54 'n Mengsel van teenliggaampies teen ASGPR en CPS1 het 'n CTC-opsporingskoers van 91% in HCC-pasiënte behaal.63 Zhang et al het 'n CTC-Chip met teenliggaampies teen ASGPR gebruik, P -CK en CPS1, en het HCC-pasiënte gedifferensieer van diegene met benigne lewersiekte of nie-HCC-kanker teen 'n koers van 100%.64 'n Studie deur Wang het EpCAM+ CTC's in 60% van 42 HCC-pasiënte opgespoor en beduidende korrelasies gevind tussen beide die positiwiteit koers en die aantal CTC'e met TNM-stadium.65 Guo et al het gevind dat 'n CTC-afgeleide PCR-telling verhoog is in 125/171 (73%) pasiënte wie se AFP-vlak <20 ng/mL was met 'n sensitiwiteit van 72.5% en 'n spesifisiteit van 95.0%, in vergelyking met 57.0% en 90.0% vir AFP by 'n afsnypunt 20 ng/ml.66 Die kombinasie van AFP en CTC's kan HCC-opsporing verbeter.45 Daar word geglo dat CTC's 'n voordeel bo AFP het in vroeë sifting van groepe met 'n hoë risiko vir HCC.Merker-gebaseerde gekombineerde opsporing van CTC's kan egter die persentasie positiewe resultate verhoog.54 'n Mengsel van anti-ASGPR en CPS1 teenliggaampies het 'n CTC-opsporingsyfer van 91% in pasiënte met HCC behaal.63 Zhang et al.gebruik 'n CTC-Chip met teenliggaampies teen ASGPR, P-CK en CPS1, en het ook pasiënte met HCC onderskei van dié met benigne lewersiekte of nie-HCC teen 'n koers van 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. frekwensie en aantal CTC's met TNM-stadium.65 Guo et al het gevind dat die PCR afkomstig van CTC's verhoog is in 125/171 (73%) pasiënte wat AFP-vlakke <20 ng/ml gehad het met 'n sensitiwiteit van 72.5% en 'n spesifisiteit van 95.0% in vergelyking met 57.0% en 90.0% vir AFP by 'n afsnyvlak van 20 ng/ml.66 Die kombinasie van AFP en CTC's kan die opsporing van HCC'e verbeter.45 CTC's word beskou as 'n voordeel bo AFP in vroeë sifting groepe.met 'n hoë risiko van HCC.Merkergebaseerde gekombineerde opsporing van CTC's kan egter die persentasie positiewe resultate verhoog.54 'n Mengsel van anti-ASGPR- en CPS1-teenliggaampies het 'n 91% CTC-opsporingskoers in pasiënte met HCC behaal.63 Zhang et al.het CTC-skyfies met teenliggaampies teen ASGPR, P-CK en CPS1 gebruik en pasiënte met HCC van benigne lewersiekte en nie-HCC met 100% onderskei.64 Wang se studie het 60% van EpCAM+ CTC's in 42 HCC-pasiënte geïdentifiseer en 'n beduidende korrelasie tussen voorkoms en aantal CTC's in die TNM-stadium gevind. 65 guo 等 人 发现 ， 在 AFP 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 中 ， CTC 衍生 的 PCR 评分 升高 ， 敏感性 为 为 72,5%， 特异性 为 95,0%， 而 而 AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值为20 ng/ml 时的特异性为为57.0% 和90.0%. 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 ， ， ctc 衍生 pcr 评分 ， 敏感性 为 为 72.5%， 为 95.0%， AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 20ng/ml 时 的 特异性 为 57.0% 和 90.0%。65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/ml. gevind dat in 125/171 (73%) pasiënte met AFP-vlakke <20 ng/ml, CTC-afgeleide PCR-waardes verhoog is met 'n sensitiwiteit van 72.5% en 'n spesifisiteit van 95.0%, terwyl AFP by afsny-spesifisiteit was was 20 ng/ml.ml was 57.0% en 90.0%.66 Die kombinasie van ORP en CTC verbeter die opsporing van HCC.Daar word vermoed dat 45 CTC's beter is as AFP in vroeë sifting van hoërisiko-HCC-populasies.Dus, vir CTC-positiewe en hoë-risiko HCC-groepe, moet CTC-toetsing gereeld gekombineer word met ultraklank en AFP-opsporing.CTC's word egter as belangrike voorspellers van tumormetastase en herhaling beskou, en opsporing van CTC's word nie onafhanklik aanbeveel as 'n diagnostiese hulpmiddel nie.62 Daarom kan CTC as 'n beter voorspellende biomerker dien as ander merkers wat tans gebruik word. Zhou et al het bevind dat pasiënte met verhoogde getalle EpCAM+ CTC's en regulatoriese T-selle 'n hoër risiko getoon het om HCC-herhaling te ontwikkel, as dié met 'n lae aantal CTC's, met 'n herhalingsverhouding van 66.7% teenoor 10.3% (P < 0.001).67 'n Soortgelyke studie is gerapporteer deur Zhong et al.68 Daarbenewens het Qi bevind dat 101 van 112 pasiënte (90.81%) met HCC, insluitend dié met vroeë stadium siekte, positief was vir CTCs en dat baie klein HCC nodules opgespoor is na 3 tot 5 maande van opvolg. Zhou et al het bevind dat pasiënte met verhoogde getalle EpCAM+ CTC's en regulatoriese T-selle 'n hoër risiko getoon het om HCC-herhaling te ontwikkel as dié met 'n lae aantal CTC's, met 'n herhalingsverhouding van 66.7% teenoor 10.3% (P < 0.001).67 A soortgelyke studie is gerapporteer deur Zhong et al.68 Daarbenewens het Qi bevind dat 101 van 112 pasiënte (90.81%) met HCC, insluitend dié met vroeë stadium siekte, positief was vir CTC's en dat baie klein HCC nodules opgespoor is na 3 tot 5 maande se opvolg. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al het bevind dat pasiënte met verhoogde EpCAM+ CTC's en regulatoriese T-selle 'n hoër risiko van HCC-herhaling gehad het as dié met lae CTC's, met 'n herhalingsyfer van 66.7% vs 10.3% (P<0.001 )67.'n Soortgelyke studie is uitgevoer deur Zhong et al.68. Daarbenewens het Qi gevind dat 101 uit 112 pasiënte (90.81%) met HCC, insluitend dié met vroeë siekte, CTCs het, en dat baie klein HCC nodules opgespoor is na 3 tot 5 maande van opvolg. Zhou 等 人 发现 ， 与 CTC 数量 较 少 的 患者 相比 ， EPCAM+ CTC 和 调节性 T 细胞 数量 升高 的 患者 发生 HCC 复发 的 风险 更 高 ， 复发率 分别 为 66,7% 和 10,3% (p <0,001)。 Zhou 等 人 发现 与 与 ctc 数量 少 的 患者 相比 ， epcam+ ctc 和 t 细胞 数量 的 患者 发生 hcc 复发 风险 更 ， 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 10.3% ( p <0,001) 。。。。。。。… Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou et al.het gevind dat pasiënte met verhoogde EpCAM+ CTC's en regulatoriese T-selle 'n hoër risiko van HCC-herhaling gehad het in vergelyking met pasiënte met minder CTC's, met herhalingsyfers van onderskeidelik 66.7% en 10.3% (P <0.001).’n Soortgelyke studie is deur Zhong et al.68 Daarbenewens het Qi gevind dat 101 van 112 HCC pasiënte (90.81%), insluitend pasiënte met vroeë siekte, positiewe CTC resultate gehad het en baie klein HCC nodules gevind het na 3 besoeke.Waarneming tot 5 maande.Hulle het ook CTC's gevind in 12 pasiënte met chroniese HBV-infeksie en klein HCC-gewasse binne 5 maande gevind in 2 CTC-positiewe pasiënte.69 Dus, CTC's kan gebruik word om HCC te voorspel, 70 maar hulle kan meer gereeld as voorspellende biomerkers gebruik word.
Soos cfDNA, word cfRNA deur verskeie stelsels in die bloedstroom vrygestel.Hierdie molekules in die perifere bloed verteenwoordig die kankerweefsel van oorsprong.In vergelyking met merkers wat deur nie-indringende metodes opgespoor word, is cfRNA's meer dinamies gereguleer, weefselspesifiek en volop in die ekstrasellulêre omgewing.Die betekenis en diagnostiese waarde van 71 miRNAs (miRNAs) in HCC is in baie studies gerapporteer.miRNA's is endogene nie-koderende RNA's (ncRNA's) wat verskeie molekulêre biologiese aktiwiteite reguleer deur die translasie van teikenboodskapper-RNA's (mRNA's) te inhibeer.miRNAs is geleë in apoptotiese liggame wat in eksosome ingekapsuleer is, maar hulle kan ook stabiel aan serumproteïene en lipiede in perifere bloed bind en kan gebruik word om HCC te evalueer.mikroRNAs is betrokke by lewerregenerasie, lipiedmetabolisme, apoptose, inflammasie en die ontwikkeling van HCC.72 Onkogene miRNAs soos miR-21, miR-155 en miR-221 is welbekend in HCC.Veral miR-21 speel 'n sleutelrol in kollageensintese in die ekstrasellulêre matriks en fibrose en bevorder hepatokarsinogenese deur hematopoietiese stamselle te aktiveer.72,73 Tumoronderdrukker miRNA's in HCC sluit miRNA-122, miRNA-29, die Let-7-familie en die miRNA-15-familie in.Die Let-7-familie bestaan ​​uit baie tumoronderdrukker miRNA's wat die RAS-familie teiken.Die miR-15-familie sluit miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 en miR-497 in, wat komplementêre volgordes vir sekere mRNA's het.Daarbenewens is lang nie-koderende RNAs (lncRNAs) en sirkelvormige RNAs (cirRNAs) ook belangrik vir vroeë sifting van HCC.lncRNAs verteenwoordig die wydste klas ncRNAs, insluitend mRNA-agtige ncRNAs, en is betrokke by die patogenese van baie menslike siektes.LncRNAs speel 'n regulerende rol in die lewer mikro-omgewing en chroniese lewersiekte.74 CircRNA's is ook 'n klas ncRNA's met veelvuldige funksies in die regulering van geenuitdrukking.Onlangs is circRNAs as diagnostiese instrumente vir HCC beskou.
Sirkulerende vry RNA het merkwaardige stabiliteit, insluitend weerstand teen temperatuur, pH en RNase, wat die isolasie van fnRNA uit perifere bloed minder vervelig maak deur gebruik te maak van standaard RNA suiweringsmetodes.Die mees algemeen gebruikte metodes sluit in NGS, microarray en RT-qPCR.NGS laat toe dat mikroRNA's regdeur die genoom gemeet word.Hierdie metode is egter duur en die ontleding is nie gestandaardiseer nie.Daarteenoor is RT-qPCR goedkoop, versterk nukleïensure vinnig, en bied baie voordele soos hoër sensitiwiteit, hoër akkuraatheid, groter dinamiese omvang en vereis minder monsters.Mikroskikkings is 'n ander metode wat gebruik word vir miRNA-opsporing gebaseer op sensitiewe en spesifieke hibridisering van teiken miRNA's met komplementêre DNA-probes, 75 maar ontleding van mikroskikkingsdata is tydrowend.
Sirkulerende miR-122 en Let-7 is gerapporteer om potensieel nuttig te wees in die diagnose van vroeë stadium HCC in hoërisikogroepe, merkers in pasiënte met HBV-geassosieerde premaligne nodules en vroeë stadium HCC.76 Cai et al.gevind dat lede van die Let-7-familie (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 en miR-199a/b) die risiko loop om chroniese HCC by pasiënte met hepatitis.Die Let-7 familie kan dien as 'n effektiewe surrogaat biomerker vir die voorspelling van die ontwikkeling van HCC in hoë-risiko groepe wat verband hou met chroniese hepatitis C. 77 miR-122 het 'n hoë diagnostiese akkuraatheid in die opsporing van vroeë HCC in pasiënte met lewersirrose.78 Serum sirkulerende MiR-107 is ook in die vroeë stadiums van HCC geëvalueer, 79 en het goeie potensiaal getoon in hoërisiko-populasies.Zhou et al het berig dat 'n paneel miRNA's (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a en miR-801) HCC van chroniese hepatitis B (CHB) en sirrose kan onderskei sensitiwiteit was onderskeidelik 79.1% en 75%, en spesifisiteit 76.4% en 91.1%.80 In HBV-verwante HCC het ons gevind dat miR150-vlakke aansienlik verminder is in vergelyking met dié in chroniese HBV-pasiënte sonder HCC (sensitiwiteit 79.1%, spesifisiteit 76.5%).-224 was verhoog in HCC in vergelyking met gesonde kontroles, en subgroepontledings het hoër vlakke in pasiënte met HCC geassosieer met HBV getoon.hepatitis B-geassosieerde sirrose en HCC pasiënte het 'n siRNA klassifiseerder geïdentifiseer wat sewe differensieel uitgedrukte siRNAs bevat wat HCC in verskillende kontroles kan opspoor;AUC-reeks by vroeë sifting is beter as AFP-vrywilligers.Hulle het gevind dat vier miRNA's (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p en miR-365a-3p) pasiënte met HCC kon onderskei van pasiënte sonder HCC.Vyf ooruitdrukking miRNAs (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p, en miR-148a-3p) word beskou as potensiële HBV-infeksies in HCC, sirrose en CHB biomerkers, veral miR-34a-5p kan biomerkers vir lewersirrose wees,85 en kan potensiële biomerkers wees vir vroeë sifting van HCC in hoërisiko-populasies.Die mees bestudeerde lncRNA in HCC is hoogs geaktiveer in lewerkanker (HULC).Ander studies het getoon dat HULC wat in HCC-pasiënte sirkuleer as 'n diagnostiese merker gebruik kan word omdat hierdie lncRNA hoogs opgereguleer is in HCC-pasiënte in vergelyking met gesonde individue.71,86 Onder ander lnRNA's word LINC00152 as die beste diagnostiese lncRNA beskou as gevolg van sy hoë AUC, sensitiwiteit en spesifisiteit.86 In een studie het perifere bloeduitdrukking van LINC00152 geleidelik toegeneem van normale gesonde kontroles na pasiënte met CHB en sirrose, en was uiteindelik die hoogste in HCC.Studies van die uitdrukking van circSMARCA5 in die plasma van pasiënte met HCC het 'n progressiewe afname in uitdrukking in HCC getoon wat wissel van hepatitis tot sirrose en voorkankeragtige letsels.87 Ontleding van ROC-kurwes het die potensiaal van hierdie circRNAs bevestig om pasiënte met hepatitis of lewersirrose te onderskei van dié met HCC, veral dié met AFP-vlakke onder 200 ng/ml.Daarbenewens het Zhu 13 617 sikliese RNAs in plasmamonsters van HBV-geassosieerde HCC-pasiënte ontleed en bevestig dat 6 sikliese RNAs verskillend uitgedruk is in HCC en HBV-geassosieerde sirrose, wat daarop dui dat cRNAs voordelig kan wees.merkers vir vroeë sifting van hoë-risiko groepe soos dié wat verband hou met lewersiekte, sklerose pasiënte.88
Eksosome is membraanvesikels 40–160 nm in deursnee;veelvuldige intrasellulêre vesikels versmelt met die selmembraan en word in die ekstrasellulêre matriks vrygestel.Hulle bevat baie aktiewe komponente, insluitend lipiede, proteïene, RNA en DNA, en speel 'n sleutelrol in kommunikasie tussen selle, beide HCC en nie-HCC selle.89,90 Eksosome reguleer die vordering van HCC deur hepatosiet fibroblaste en stellaatselle, immuunselle, normale hepatosiete en HCC-selle te aktiveer.91 In die tumormikro-omgewing produseer tumorselle 'n groot aantal eksosome wat van kankerselle na onvolwasse selle gedra word, wat op hul beurt betrokke is by onkogenese, degradasie en sellulêre sein.92 Studies het getoon dat eksosome onkogene na normale selle kan oordra tydens patologiese prosesse, wat een van die meganismes van tumorindringing en metastase kan wees.93 Die rol van eksosome in kankerprogressie kan dinamies en spesifiek vir kankertipe wees, 89 Eksosome kan geïnternaliseer word deur aangrensende of verre selle om veelvuldige teikengene in ontvangerselle te reguleer wat betrokke kan wees by intersellulêre kommunikasie-ione en sellulêre mikro-omgewing-interaksies, hulle kan bemiddel sellulêre sein en metabolisme.94 Eienskappe en dinamiese veranderinge van eksosoomvragmolekules weerspieël direk die eienskappe en dinamiese veranderinge van ouer tumorselle,95 wat ook die basis is vir die gebruik van eksosome in die diagnose en prognose van kanker, sowel as vir die voorspelling van individuele reaksie op kankerterapie ..96
Tradisionele laboratoriummetodes vir die isolering en ontleding van eksosome is kompleks, multi-stap en tydrowend, insluitend ultrasentrifugering, filtrasie, grootte-uitsluitingchromatografie, immunoaffiniteitsuiwering, Western blotting, ensiemgekoppelde immunosorbenttoets (ELISA), PCR en vloei-analise.geminiaturiseerde stelsels en laboratorium-op-'n-skyfie-platforms wat mikro/nanotegnologie gebruik, word wyd ontwikkel vir vinnige, gerieflike in situ isolasie van eksosome.Nanopartikelnasporingsanalise (NTA) is 'n wyd gebruikte metode om die grootte en konsentrasie van eksosome te karakteriseer, insluitend metodes soos magnetiese nanopartikels en polihidroksielkanoate.Mikrofluïdiese en elektrochemiese metodes kan ook vinnig eksosome in hoë opbrengste opspoor.
Eksosomale proteïene is belangrike merkers vir die diagnose van HCC.In die Arbelaiz-studie was die vlak van 98 RasGAP SH3-bindende proteïen (G3BP) en polimeriese immunoglobulienreseptor (PIGR) aansienlik verhoog in HCC-afgeleide eksosome, en die vermeende gekombineerde doeltreffendheid van die twee proteïene was beter as dié van AFP.Ysteroorlading is 'n belangrike faktor wat bydra tot die ontwikkeling van HCC.Tseng het berig dat hepsidien 'n sleutelrol kan speel in weerstand teen HCC.99 Eksosome afkomstig van die sera van HCC-pasiënte het 'n aansienlik hoër kopiegetal hepsidien-mRNA-variante gehad as hul gesonde eweknieë, wat daarop dui dat hepsidien 'n nuwe diagnostiese biomerker vir HCC kan wees.Die 14-3-3ζ proteïen in eksosome wat deur 100 HCC geproduseer word, kan T-selaktivering, proliferasie en differensiasie verminder en kan T-seltransformasie in regulatoriese T-selle veroorsaak, wat lei tot T-sel-uitputting.101 Dit word ondersteun deur verskeie studies wat tumorontduiking van immuuntoesig ondersoek, 102 wat kan bydra tot HCC tumorgenese.
Benewens die teenwoordigheid van ecRNA in plasma of serum, kan RNA-verrykte eksosome gebruik word vir nie-indringende intydse stadiëring in vroeë tumor sifting en om tumor evolusie en reaksie op terapie te bepaal.Die vlak van eksosomale miRNA-21 in die bloedserum in die HCC-groep was 2.21 keer hoër as in die CHB-groep, en in die HCC-groep was dit 5.57 keer hoër as in die gesonde bevolking.In die Wang-studie het eksosome HCC aansienlik verhoog in vergelyking met sirrotiese pasiënte met AUC-waardes van 0.83 (95% CI 0.74-0.93) en 0.94 (95% CI 0.88-1.00).104 Die data wat verkry is, het die betrokkenheid van spesifieke eksosomale vragmolekules in die regulering van onkogenese en HCC-vordering toegelig.105 Serumuitdrukking van miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 en miR-26a is konsekwent.en metastase, en miR21-vlakke was baie hoër in HCC pasiënte as in gesonde kontroles en ook in CHB pasiënte.102 LncRNA het potensiële diagnostiese waarde in HCC gehad.Studies het getoon dat eksosome afkomstig van die sera van HCC-pasiënte aansienlik hoër vlakke van LINC00161, LINC000635 en lncRNA het wat geaktiveer word deur groeifaktor-β te transformeer as in pasiënte sonder HCC, en hierdie lncRNA's word sterk geassosieer met TNM-stadium en tumorvolume.110 Conigliaro et al.Daar is gevind dat CD90+ eksosome hoë vlakke van lncRNAH19 uitdruk, wat vaskulêre endoteelgroeifaktor (VEGF) vrystelling en VEGF-R1 reseptor produksie aansienlik verhoog het, en sodoende angiogenese stimuleer.93 CircRNAs is 'n ander tipe eksosomale ncRNAs - uitgedruk op laer maar stabiele vlakke oor spesies, circRNAs toon ook spesifisiteit vir seltipe, weefseltipe, ontwikkelingstadium en regulatoriese aktiwiteit.111 circRNAs is diagnostiese biomerkers vir vroeë en minimaal indringende kanker.112 Onlangse kliniese proewe het getoon dat die spesifisiteit van individuele miRNA's in die voorspelling van HCC nie ideaal is nie.Daarom kan komplekse opsporing met behulp van veelvuldige toetse (bv. miR-122 en miR-48a in kombinasie met AFP) die identifikasie van vroeë HCC en die differensiasie van HCC van sirrose verbeter.100
Pasiënte met CHB en lewersirrose is die mees algemene hoërisikogroep vir die ontwikkeling van HCC.Vir hoërisikogroepe, sodra 'n volgehoue ​​virologiese reaksie bereik is, moet 'n koste-effektiewe toesigstrategie gebaseer op HCC risiko ontwikkel word, en vroeë sifting is die sleutel tot die verbetering van die diagnose en behandeling van HCC met 'n hoë koste-effektiwiteitsverhouding2 ..Vroeë siftingsmetodes vir kanker het baie beperkings: effektiewe vroeë siftingsmetodes is nie vir die meeste soorte kanker ontwikkel nie, en nakoming is gewoonlik laag.In vergelyking met tradisionele vroeë siftingsmetodes, het vloeibare biopsie-tegnologie ooglopende voordele: gemak van monsterneming, panrac-opsporing, goeie monsterreproduseerbaarheid en effektiewe reaksie op tumorheterogeniteit.Gegewe die koste-effektiwiteit van die metodes wat met vloeibare biopsie geassosieer word, is die gebruik daarvan in HCC-sifting nie gereeld getoets nie.Ten spyte van vooruitgang in akkurate opsporing op molekulêre vlak, is vloeistofbiopsie duur om HCC by teikenpasiënte op te spoor, wat die wydverspreide gebruik daarvan beperk in vergelyking met spesifieke beeldingsprosedures soos ultraklank- en magnetiese resonansbeelding.113,114 'n Vorige studie het egter getoon dat vloeibare biopsie 'n beduidende voordeel in terme van kwaliteit-aangepaste lewensjare (QALYs) getoon het.115 Die voordele van vloeibare biopsie in vroeë karsinoom van die maag en nasofarinks is ook getoon.116,117 Die huidige siening is dat vloeibare biopsie serum biomerkers en radiologiese sifting kan aanvul in die opsporing en diagnose van gewasse.117 118
Volgens huidige literatuur het vloeistofbiopsie-tegnologie aansienlik hoër sensitiwiteit en spesifisiteit getoon in vroeë sifting van hoërisikogroepe vir lewerkanker.Ongeag die tipe vloeistofbiopsie, kan dit HCC van hoërisiko-individue sonder HCC onderskei, wat die belangrikheid van vroeë sifting suggereer aangesien verskille tussen hoërisiko- en gesonde individue duidelik is.ctDNA het 'n kort halfleeftyd en kan gebruik word om HCC op te spoor, so enige veranderinge in tumor-afgeleide cDNA kan intydse konkrete bewyse van tumorprogressie verskaf, veral vir klein gewasse.'n Hoë vlak van ctDNA dui op die ontwikkeling en verspreiding van kanker en is 'n vroeë aanduiding van vordering en herhaling.Daarbenewens, gebaseer op die resultate van ctDNA, kan pasiënte geïndividualiseerde behandeling en opvolg ontvang.119 Spesifieke metileringsplekke kan 'n beter merker as AFP wees vir vroeë identifikasie van HCC en sirrotiese nodules.In resekteerbare gevalle van HCC is hoë vlakke van cDNA 'n aanduiding van mikrovaskulêre inval en postoperatiewe herhaling en metastase.Veranderinge in kopienommer word geassosieer met die oorlewing van pasiënte met HCC.Daar kan aanvaar word dat cDNA-evaluering betrokke kan wees by die algehele behandeling van HCC, en cDNA kan dien as 'n effektiewe aanwyser van terapeutiese modulasie.Merkers gebaseer op spesifieke genetiese mutasies in ctDNA is deur kliniese riglyne aangeneem om doeltreffendheid te voorspel en geneesmiddelweerstand te monitor.ctDNA-toetsing kan die nuttigste vloeibare biopsie-instrument vir vroeë sifting wees.CTC's speel ook 'n sleutelrol in die vroeë sifting van hoërisiko-HCC-groepe.Verskeie merkers van HCC-geassosieerde CTC's is van besondere belang in die aanvang, ontwikkeling en herhaling van HCC.As membraanvesikels is eksosome betrokke by intersellulêre kommunikasie, veral in HCC-selle.Sirkulerende mikroRNA's is stabiel in die bloed en kan dus meer bruikbaar wees vir vroeë sifting van HCC.Geleidelik is eksosomale proteïene en RNA-ryke eksosome ontdek, en hul voorspellende doeltreffendheid vir HCC is bevestig.Interessant genoeg kan verskillende etiologieë van HCC ook met verskillende mutasies geassosieer word, sodat ons verskillende biomerkers vir vroeë sifting kan kies gebaseer op verskillende etiologieë van HCC.120
Huidige vloeistofbiopsie-tegnieke is egter twyfelagtig in terme van stabiliteit en kan nie onafhanklik vroeë sifting of monitering van HCC uitvoer nie, maar kan steeds individuele sifting en diagnose aanvul.121 As 'n vorm van vloeibare biopsie het die opsporing en beeldvorming van ctDNA, CTC, cfRNA en eksosoom-geassosieerde AFP of PIVKA-II belowende toepassings in die vroeë diagnose en prognose van HCC.Die presiese meganisme van ctDNA-vrystelling in die bloed moet egter nog uitgeklaar word.Die onthulling van die basiese biologiese eienskappe van ctDNA kan die gebruik daarvan as 'n merker vergemaklik.Die klein hoeveelheid ctDNA in die sirkulasie en streng monsterhanteringsvereistes is uitdagings vir die kliniese implementering van cDNA-opsporing in HCC.Daarbenewens het genetiese mutasies nie spesifieke kenmerke wat akkurate identifikasie van karsinogene moontlik maak nie.Aangesien verskeie genetiese en somatiese variante ook in normale weefsels teenwoordig is, kan genetiese mutasies wat deur vloeistofbiopsie geïdentifiseer word, van beperkte nut wees in vroeë sifting vir HCC.122 Die beperkings van goed gedefinieerde bruikbare geen-teikens en biomerkers wat help om cDNA van nie-tumor-DNS te onderskei, is die belangrikste kwessies in die gebruik van cDNA.gebrek aan bruikbaarheid van sensitiewe en spesifieke merkers vir die opsporing van CTC's.Slegs lewensvatbare selle met metastatiese potensiaal is gevind, en die optimale kombinasie van CSC-verrykte merkers was onduidelik.Isolasie van CTC's vir kultuur en evaluering van hul mutasieprofiele is ook 'n uitdagende taak.As gevolg van probleme met die identifikasie, isolasie en suiwering van eksosome, is die spesifieke molekulêre meganisme nog onduidelik, en vorige studies oor die meganisme van eksosome en HCC was nie in diepte nie, en die manier waarop miRNAs, lncRNAs en proteïene in eksosome gesorteer word , en dit is nie duidelik of eksosomopname 'n spesifieke tipe proses is nie.Die gebruik van eksosome vir die diagnose en behandeling van HCC is nog in die prekliniese stadium.Die gebrek aan standaardisering van vloeibare biopsieprosedures, soos die tipe buise wat gebruik word om bloed, bloedvolume, monsterberging en opsporing, isolasie en verryking te versamel, kan die gebruik daarvan in roetine-kliniese praktyke verhinder as gevolg van verskille in praktyke oor mediese sentrums.Die doeltreffendheid van vloeibare biopsie in vroeë sifting, diagnose, doeltreffendheid-evaluering en voorspelling van HCC moet nog ondersoek word, veral vir hoërisikogroepe.Vloeistofbiopsietegnologie het groot potensiaal en sal na verwagting in die nabye toekoms wyd gebruik word in die kliniese praktyk van lewerkanker.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN skat die voorkoms en sterftes van 36 soorte kanker in 185 lande.CA Kanker J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Hoofkwartier van die Nasionale Gesondheidskommissie.Kriteria vir die diagnose en behandeling van primêre lewerkanker (2022-uitgawe) [J].Tydskrif vir Kliniese Lewersiektes, 2022, 38(2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Riglyne vir die diagnose en behandeling van hepatosellulêre karsinoom (2019-uitgawe).Lewer kanker.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Kliniese praktykriglyne vir hepatosellulêre karsinoom: Japanese Society for Lewersiektes, 2017 (JSH-HCC 4de riglyne), 2019-opdatering.Lewersiekte Reservoir.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Vloeibare biopsie in chroniese lewersiekte.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Vloeibare borskankerbiopsie: 'n gefokusde oorsig.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Toesig vir hepatosellulêre karsinoom: huidige beste praktyke en toekomstige rigtings.Gastroënterologie.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Europese Navorsingsvereniging L, Europese Organisasie R, C Therapeutics.Kliniese riglyne EASL-EORTC: behandeling van hepatosellulêre karsinoom.J Heparien.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Gekombineerde analise van AFP en HCCR-1 as bruikbare serologiese merkers in klein hepatosellulêre karsinoom: 'n voornemende kohortstudie.Dis Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Differensiële uitdrukking van plasma mikroRNA-125b in hepatitis B-virus-geassosieerde lewersiekte en diagnostiese potensiaal van hepatitis B-virus-geïnduseerde hepatosellulêre karsinoom.Lewersiekte reservoir.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biologie en betekenis van alfa-fetoproteïen in hepatosellulêre karsinoom.Lewer int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Kliniese riglyne vir die behandeling van hepatosellulêre karsinoom in die Asië-Stille Oseaan-streek: 2017-opdatering.Internasionale Organisasie vir Lewersiektes.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Diagnostiese waarde van serum PIVKA-II alleen of in kombinasie met AFP in Chinese pasiënte met hepatosellulêre karsinoom.Dis Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Nie-kleinselle longkanker nie-plasma humorale vloeistof biopsie: nader aan die gewas!sel.2020;9(11).doi: 10.3390/selle9112486
15. Mader S, Pantel K. Liquid biopsie: huidige status en toekomstige vooruitsigte.Behandeling Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Vloeistofgebaseerde kankerbiopsie: 'n multimodale diagnostiese hulpmiddel in kliniese onkologie.Die Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Nukleïensure in menslike plasma.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Gevorderde opsporing van sirkulerende tumor-DNA deur fragmentgrootte-analise.Wetenskap vertaal medisyne.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Sirkulerende tumor DNA fragment lengte.PLOS gene.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Sirkulerende tumor DNA: 'n belowende biomerker in vloeistof-gebaseerde kanker biopsie.teiken gewas.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Opsporing van sirkulerende tumor-DNA in vroeë en laat stadiums van menslike maligniteite.Wetenskap vertaal medisyne.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Vloeibare biopsie vir mutasionele voorspellende analise van soliede kanker: 'n patoloog se perspektief.J Biotegnologie.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Vroeë tumoropsporing deur sirkulerende plasma-DNS-sifting: hype of hoop?Belgiese kliniese reg.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Effek van hepatitisvirus en veroudering op DNA-metilering in menslike hepatokarsinogenese.Histopatologie.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647